人铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆和在乳酸乳球菌中的表达

被引:12
作者
向华
卫文仲
谭华荣
郭顺星
机构
[1] 中国科学院微生物研究所!北京,中国科学院微生物研究所!北京,中国科学院微生物研究所!北京,中国医学科学院药用植物研究所!北京
基金
中国博士后科学基金;
关键词
超氧化物歧化酶; 基因克隆与表达; 乳酸乳球菌;
D O I
10.13345/j.cjb.2000.01.002
中图分类号
Q933 [微生物遗传学];
学科分类号
071007 ;
摘要
采用RTPCR技术从人肝总RNA中分离扩增了045kb的人铜锌超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)基因的cDNA序列,首先克隆至大肠杆菌表达质粒pET23b,进行了序列测定和超高表达。将Cu/ZnSODcDNA亚克隆至乳酸乳球菌表达载体pMG36e,用电穿孔法将重组质粒pMG36esod转化到乳酸乳球菌中,获得Cu/ZnSOD的组成型表达,其表达量约占乳酸乳球菌可溶性蛋白的5%以上,活性染色表明该工程菌表达的Cu/ZnSOD具有较好的酶活性。
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