当归拈痛汤对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞自噬与凋亡的影响

被引:26
作者
陆麒瑾 [1 ]
李佳钰 [2 ]
蔡义思 [1 ]
林鸿鑫 [1 ]
范丹丹 [3 ]
接力刚 [3 ]
袁立霞 [1 ,4 ]
机构
[1] 南方医科大学中医药学院
[2] 南方医科大学检验与生物技术学院
[3] 南方医科大学珠江医院
[4] 南方医科大学第五附属医院
关键词
当归拈痛汤; 类风湿关节炎; 成纤维样滑膜细胞; 自噬; 凋亡;
D O I
暂无
中图分类号
R285 [中药药理学];
学科分类号
100806 [中药药理学];
摘要
目的:研究当归拈痛汤对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞自噬与凋亡的影响,进一步探讨当归拈痛汤防治RA的相关机制。方法:收集临床RA患者的滑膜组织,分离出成纤维样滑膜细胞(FLS)并进行培养,将RA-FLS细胞分为4组,分别为空白血清组、当归拈痛汤含药血清低、中、高剂量组。通过划痕实验,transwell侵袭实验检测当归拈痛汤对RA-FLS细胞迁移、侵袭能力的影响;Hoechst 33342法检测RA-FLS细胞凋亡水平;单丹磺酰尸胺(MDC)染色检测细胞自噬水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),微管相关蛋白1轻链3(LC3),自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)的mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常血清组比较,当归拈痛汤含药血清低、中、高剂量组均能减缓划痕愈合(P<0.01),并且能显著减少侵袭到下室的RA-FLS细胞的数目(P<0.01);Hoechst33342结果显示当归拈痛汤含药血清低、中、高可以不同程度促进RA-FLS细胞凋亡(P<0.01);MDC染色后,低、中、高当归拈痛汤含药血清组中自噬小体明显减少;与空白含药血清组比较,当归拈痛汤含药血清低、中、高剂量干预后,Bcl-2,LC3,Beclin1的mRNA和蛋白的表达水平显著下降(P<0.01),Bax的mRNA和蛋白的表达水平显著升高(P<0.01)。结论:当归拈痛汤对RA成纤维样滑膜细胞增殖有明显抑制作用,其作用机制可能与抑制自噬、促进凋亡有关。
引用
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