基于Notch信号通路研究白头翁汤对溃疡性结肠炎小鼠肠黏液屏障的保护作用

目的 探讨白头翁汤对葡聚糖硫酸钠（dextran sodium sulfate,DSS）诱导的溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）小鼠肠黏液屏障的保护作用以及对Notch通路的影响。方法 C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、美沙拉嗪（50 mg/kg）组和白头翁汤低、高剂量（7.4、14.8 g/kg）组，对照组小鼠自由饮用纯净水，其余各组连续8 d自由饮用2.5%DSS溶液诱导UC模型，造模同时各给药组ig相应药物。每日记录小鼠体质量、粪便稠度以及血便情况；采用苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理变化；采用AB-PAS染色观察结肠组织黏蛋白2(mucin 2,MUC2)的分泌情况；ELISA法检测结肠组织中髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）活性及促炎因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和抗炎因子IL-10的含量；免疫组化法检测结肠组织Ki67的表达情况；免疫荧光法测定结肠组织富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(leucine-rich repeat-containing G-protein-coupled receptor 5,Lgr5+)肠道干细胞（intestinal stem cells,ISCs）阳性细胞数；Western blotting测定结肠组织Notch-1、Atoh1、Hes1和MUC2蛋白表达。结果 与模型组比较，白头翁汤能够缓解DSS诱导的UC小鼠体质量降低和疾病活动指数（disease activity index,DAI）升高（P<0.05、0.01、0.001），缓解结肠组织的缩短、水肿以及病理学损伤（P<0.01、0.001），减少炎性细胞浸润、隐窝的破坏与杯状细胞的丢失，降低结肠组织MPO活性和IL-1β、TNF-α水平（P<0.05、0.01），升高IL-10水平（P<0.05），增加结肠组织Ki67阳性细胞数（P<0.01），促进MUC2的分泌和Lgr5+ISCs的阳性细胞数，并下调Notch和Hes-1蛋白表达水平（P<0.05、0.001），上调Atoh1和MUC2蛋白表达水平（P<0.05、0.01）。结论 白头翁汤能够降低UC小鼠结肠组织促炎细胞因子水平，增加Lgr5+ISCs的增殖和分化，保护隐窝和杯状细胞结构，促进MUC-2分泌，其作用可能与调控Notch-1/Atoh1/Hes1通路密切相关。