磁性荧光纳米颗粒标记免疫层析技术检测副溶血性弧菌热稳定直接溶血素的试验研究

被引：6

作者：

向辉 ^{[1
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朱海 ^{[2
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孙世宏 ^{[1
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李颖 ^{[2
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王西丽 ^{[2
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张汉斌 ^{[1
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柳勤 ^{[1
]}

机构：

[1] 广州市天河区疾病预防控制中心

[2] 深圳市易瑞生物技术有限公司

来源：

中国食品卫生杂志 | 2017年 / 29卷 / 03期

关键词：

副溶血性弧菌; 热稳定直接溶血素; 荧光纳米颗粒标记技术; 免疫层析; 检测;

D O I：

10.13590/j.cjfh.2017.03.010

中图分类号：

R155.3 [饮食中毒与饮食性疾病的预防];

学科分类号：

摘要：

目的通过抗体与标记的磁性荧光纳米颗粒相结合的免疫层析技术,建立一种快速检测产热稳定直接溶血素(TDH)副溶血性弧菌的方法。方法构建产TDH副溶血性弧菌基因片段并进行扩增,扩增产物与质粒载体(p ET-28a)连接,并在大肠埃希菌中表达,制备抗体。抗体与标记的磁性荧光纳米颗粒偶联后,制成免疫层析检测试纸条。将混有不同浓度标准菌株样品和阴性对照样品分别与荧光纳米颗粒-单抗偶联物和试纸条共同反应5min,紫外光下肉眼观察结果。对试验的敏感性、特异性、重复性进行测试并进行样品模拟试验。结果重组质粒载体在大肠埃希菌BL21(DE3)可稳定高效地表达分子量为26 k D的可溶形式的目的蛋白,并实现了单克隆抗体与磁性荧光颗粒很好的偶联,所得偶联物与最低浓度10 CFU/ml阳性菌株反应,阴性对照菌株无反应。结论试验制备的产TDH副溶血性弧菌毒力基因表达产物与磁性荧光纳米颗粒有机结合,检测操作过程简单,具有灵敏度高、特异性强、重复性好和检测时间短等特点。

引用

页码：302 / 306

页数：5

共 6 条

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