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产志贺毒素Ⅱ型变异体大肠杆菌LAMP检测方法的建立
被引：5
作者：
冯瑜菲
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机构: 东北农业大学动物医学学院
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[1] 东北农业大学动物医学学院
来源：
关键词：
产志贺毒素Ⅱ型变异体;
环介导恒温扩增;
大肠杆菌;
猪水肿病;
D O I：
10.16656/j.issn.1673-4696.2011.03.011
中图分类号：
S852.612 [];
学科分类号：
摘要：
为建立产志贺毒素Ⅱ型变异体(Stx2e)大肠杆菌的环介导恒温扩增(LAMP)检测方法,参照Gen-Bank中12条Stx2e序列和9条Stx2序列,针对Stx2e基因保守区域设计并合成4条引物,分别进行了反应条件优化、特异性试验、敏感性试验及模拟样品检测。结果显示,用所建立的LAMP方法对阳性样品扩增所得产物电泳后呈特征性梯状条带,阴性样品的扩增产物电泳后均无扩增条带。建立的LAMP方法对Stx2e+大肠杆菌的最低检出量为38CFU/管,敏感性高于PCR方法(3.8×103CFU/管)。LAMP和PCR对模拟样品检测结果的符合率为100%。该研究为仔猪水肿病的诊断和Stx2e+大肠杆菌的快速检测提供了新的方法。
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