五味子乙素对谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及其机制

目的:探讨五味子乙素（SchB）对谷氨酸（Glu）致人神经母瘤细胞SH-SY5Y细胞损伤的保护作用,阐明其对ATR信号通路的影响。方法:将处于对数生长期的SH-SY5Y细胞分为对照组、DMSO组、模型组、SchB1组、SchB2组和SchB3组。对照组SH-SY5Y细胞不做任何处理;DMSO组SH-SY5Y细胞用17mmol·L-1 DMSO作用24h;模型组SH-SY5Y细胞用20 mmol·L-1 Glu孵育24h造成细胞损伤模型;SchB1、SchB2和SchB3组采用0.05、0.10和1.00μmol·L-1浓度SchB预处理SH-SY5Y细胞24h后再用Glu(20mmol·L-1)继续孵育24h。MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blotting法检测ATR、p-CHK1、p-Cdc25c和P53蛋白表达情况。结果:MTT法检测,与模型组比较,SchB1、SchB2和SchB3组细胞存活率明显升高（P<0.05或P<0.01）,且SchB2组细胞存活率最高,故选取SchB2组作为SchB组进行后续实验。细胞周期检测,与对照组比较,模型组G0/G1期细胞所占百分比降低（P<0.05）,S期和G2/M期细胞所占百分比升高（P<0.05）;与模型组比较,SchB组G0/G1期细胞所占百分比升高（P<0.05）,S期和G2/M期细胞所占百分比降低（P<0.05）。Western blotting法检测,与对照组比较,模型组细胞中ATR、p-CHK1、p-Cdc25c和P53蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;与模型组比较,SchB组细胞中ATR、p-CHK1、p-Cdc25c和P53蛋白表达水平均降低（P<0.05）。结论:SchB对Glu致SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用,其机制可能与下调ATR信号通路、减少细胞周期阻滞有关。