南瓜RAPD分析体系的优化

被引：10

作者：

周辉

赵福宽

林成

高遐虹

程继鸿

机构：

[1] 北京农学院植物科技系

[2] 新疆农业大学园艺学院

[3] 北京农学院植物科技系北京

[4] 北京

[5] 新疆乌鲁木齐

来源：

云南农业大学学报 | 2005年 / 02期

关键词：

南瓜; RAPD; 反应体系;

D O I：

暂无

中图分类号：

S642.1 [南瓜];

学科分类号：

090202 ;

摘要：

为确保南瓜RAPD反应结果的稳定性和重复性,对MgCl2浓度、dNTPs浓度、Taq酶含量、引物浓度、模板DNA浓度、复性温度、PCR循环次数等影响南瓜RAPD结果的重要因素进行了初步研究。最终优化的南瓜RAPD反应体系为25μL反应液中:10×反应buffer(100mmol/LTris-HCl,100mmol/LKCl,80mmol/L(NH4)2SO4,pH9.0,NP-40)2.5μL,3mmol/LMgCl2,0.2mmol/LdNTPs,Taq酶l.0U,引物15ng/μL,DNA模板10ng/μL。本研究最终确立的PCR反应程序为:94℃预变性5min,然后按94℃变性30s,37℃退火30s,72℃延伸90s,进行40个循环,最后72℃延伸5min。在此条件下得到的RAPD图谱可为南瓜遗传多样性、分子标记及辅助育种等研究提供有效的手段。

引用

页码：172 / 178

页数：7

共 17 条

[1] 适于核桃的RAPD-PCR反应体系的建立 [J].