共 4 条
四引物PCR扩增反应的单管SNP快速测定法
被引：28
作者：
卜莹
古卓良
张晓丹
周国华
机构：
[1] 南京军区联勤部军事医学研究所,南京军区联勤部军事医学研究所,南京军区联勤部军事医学研究所,南京军区联勤部军事医学研究所南京,南京,南京,南京
来源：
关键词：
单核苷酸多型性;
聚合酶链反应;
等位基因特异性延伸反应;
人为错配碱基;
D O I：
10.13865/j.cnki.cjbmb.2004.02.022
中图分类号：
R346 [];
学科分类号：
1001 ;
摘要：
建立一种在单管中进行单核苷酸多型性 (SNP)快速测定的高效廉价方法 .以人ABCA1基因中的I82 3M为研究对象 ,设计 4种引物进行PCR扩增 ,其中两种引物用于扩增一段含有SNP位点的DNA片段 ,另两种引物为SNP位点特异性引物 ,4种引物在单管中同时进行PCR扩增反应 ,根据延伸产物的长度确定SNP的类型 .为提高SNP测定的特异性 ,在特异性引物的 3′端倒数第 3个碱基引入了一个人为错配碱基 ,使引物的错误延伸率显著降低 ,大大提高了SNP分析的准确性 .实验结果表明 ,所建立的方法简单 ,操作简便 ,可在单管中完成SNP的测定反应 .
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