亚麻SRAP-PCR反应体系的优化建立及多态性标记筛选

被引：6

作者：

郝荣楷 ^{[1
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张建平 ^{[2
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党占海 ^{[2
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赵利 ^{[2
]}

李闻娟 ^{[2
]}

机构：

[1] 甘肃农业大学农学院

[2] 甘肃省农科院作物研究所

来源：

甘肃农业大学学报 | 2013年 / 48卷 / 05期

关键词：

亚麻; SRAP标记; 正交试验; 体系优化; 引物筛选;

D O I：

10.13432/j.cnki.jgsau.2013.05.008

中图分类号：

S563.2 [亚麻];

学科分类号：

摘要：

以亚麻叶片DNA为模板,以Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物和Taq DNA聚合酶进行4因素3水平正交试验设计,对亚麻SRAP反应体系进行优化,并比较了不同浓度模板DNA对扩增效果的影响,建立了亚麻的SRAP最佳反应体系.结果表明:亚麻SRAP-PCR最佳反应体系为2.5μL 10×Loading buffer、Mg2+浓度3.0mmol/L、dNTPs浓度0.25mmol/L、引物浓度0.2μmol/L、Taq DNA聚合酶1.0U、模板DNA 75ng,总体积为25μL.各因素对扩增反应结果均有不同影响,其中以Mg2+浓度影响最大,Taq DNA聚合酶的影响最小.运用该体系对15份不同来源亚麻品种进行验证,证明该体系稳定可靠,并从169个SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的引物组合21个.

引用

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页数：7

共 18 条

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