[目的]建立简易方法检测湛江市湖光牛奶脂肪酸,并分析其营养价值。[方法]以BF3/MeOH溶液为衍生化试剂,正十七碳饱和脂肪酸(C17:0)为内标,牛奶脂肪酸的抽提和甲酯化一步完成;经DB-WAX石英毛细管柱分离,气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)进行定性定量分析。[结果](1)本方法重现性试验脂肪酸CV为1.15%~5.68%,仪器重现性CV为2.31%~9.81%,回收率为84.2%~105.0%。(2)湖光牛奶含有16种脂肪酸,平均饱和脂肪酸:单不饱和脂肪酸:多不饱和脂肪酸为11.80:4.38:1,饱和脂肪酸的含量最高,达到69%;多不饱和脂肪酸的含量最低,仅为6%;ω-6/ω-3脂肪酸比率为2.30。[结论]本方法高效易行,准确可靠,节省时间,适合大标本量的检测;湖光牛奶饱和脂肪酸,单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸比例不均衡,有必要优化脂肪酸的组分以提高其营养价值。