siRNA介导hPOT1基因表达抑制对HeLa细胞Caspase-3的影响

被引：5

作者：

侯敢

黄迪南

姜英华

梁爱玲

机构：

[1] 广东医学院生物化学与分子生物学研究所

来源：

中国药理学通报 | 2006年 / 02期

基金：

广东省自然科学基金;

关键词：

RNA干扰; hPOT1基因; HeLa细胞株; Caspase-3;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

1001 ;

摘要：

目的应用siRNA表达载体介导的RNA i技术,特异地抑制端粒保护蛋白POT1基因在HeLa细胞中的表达,并观察其对细胞Caspase-3活化的影响。方法利用作者课题组先前构建的含hPOT1基因特异性序列(hsDNA)的3种重组siRNA表达质粒(pmU6-shRNA1、pmU6-shRNA2和pmU6-shRNA3),由脂质体介导转染HeLa细胞,以RT-PCR和EM-SA法检测转染细胞中的hPOT1基因的表达抑制效果,并通过RT-PCR、W estern b lot和Caspase-3检测试剂盒分析Caspase-3表达和活化。结果3种pmU6-shRNA重组质粒转染HeLa细胞48 h后,细胞中hPOT1基因mRNA和蛋白质表达水平均降低,Caspase-3 mRNA表达水平基本无变化,Caspase-3酶原水平降低,而Caspase-3酶活性增高。结论siRNA表达载体介导的RNA i能有效地抑制HeLa细胞中hPOT1基因表达,hPOT1基因表达的抑制导致细胞Caspase-3活化。

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页码：193 / 197

页数：5

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