内热针干预膝骨性关节炎兔软骨下骨Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶3和骨桥蛋白的表达

背景:内热针疗法是在温针灸疗法基础上,经过现代工艺改良升级的物理治疗方法,兼具针刺效应和热效应,在临床上治疗膝骨性关节炎疗效显著,但对其具体机作用制缺乏了解。目的:探讨内热针作用于兔膝骨性关节炎,对软骨下骨中Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶3、骨桥蛋白表达的影响及其可能的作用机制。方法:30只无特定病原体的新西兰兔采用随机数字表法,分为空白组、模型组和治疗组,每组各10只。模型组和治疗组采用经典Hulth方法选取兔左后肢膝关节进行兔膝骨性关节炎造模。治疗组选取兔左后肢膝关节进行内热针疗法干预,每周1次,每次20 min;空白组和模型组不给予任何治疗。干预4周进行实验兔左后膝关节取材,使用改良版Lequesne MG量表对各组实验兔干预前后进行行为学评价;采用甲苯胺蓝染色观察各组实验兔膝关节软骨下骨组织形态学变化;分别采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测3组软骨下骨中Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶3、骨桥蛋白的蛋白及mRNA表达。动物实验方案通过宁夏医科大学总医院医学科研伦理审查委员会批准(批准号:2018064)。结果与结论:①与空白组相比,模型组和治疗组兔的行为学评分显著升高(P <0.05);与模型组相比,治疗组兔的行为学评分显著降低(P <0.05),且干预前后差值更大(P<0.05);②与空白组相比,模型组软骨下骨的骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁数目明显降低(P<0.05),骨小梁弥散度明显升高(P <0.05);Ⅰ型胶原蛋白及其mRNA表达水平显著降低(P <0.001),基质金属蛋白酶3、骨桥蛋白的蛋白及其mRNA表达水平显著升高(P <0.001);与模型组相比,治疗组软骨下骨的骨小梁面积百分数,骨小梁数目明显升高(P <0.05),骨小梁弥散度明显降低(P <0.05);Ⅰ型胶原蛋白及其mRNA表达水平显著升高(P <0.05),基质金属蛋白酶3、骨桥蛋白的蛋白及其mRNA表达水平显著降低(P <0.05);③Ⅰ型胶原水平变化与骨小梁面积百分数、骨小梁数目呈正相关关系,与骨小梁弥散度呈负相关关系;骨桥蛋白、基质金属蛋白酶3和骨桥蛋白/基质金属蛋白酶3比值变化与骨小梁面积百分数、骨小梁数目呈负相关关系,与骨小梁弥散度呈正相关关系;④结果说明,内热针疗法可能通过上调Ⅰ型胶原表达和下调基质金属蛋白酶3、骨桥蛋白表达,实现软骨下骨微结构修复。