应用噬菌体展示肽库技术淘选大鼠CCR5膜外第一、二胞外环特异性结合的活性拮抗肽与初步鉴定

被引：9

作者：

刘思雪 ^{[1
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胡梅 ^{[1
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叶小研 ^{[1
,2
]}

黄花荣 ^{[3
]}

钟英强 ^{[1
]}

机构：

[1] 中山大学孙逸仙纪念医院消化内科

[2] 广东药学院附属第一医院消化内科

[3] 中山大学孙逸仙纪念医院儿科

来源：

中国病理生理杂志 | 2015年 / 31卷 / 07期

基金：

广东省自然科学基金;

关键词：

CC趋化因子受体5; 拮抗肽; 噬菌体展示;

D O I：

暂无

中图分类号：

R574.62 [结肠疾病];

学科分类号：

100201 [内科学];

摘要：

目的:利用噬菌体展示肽库技术淘选与大鼠CC趋化因子受体5(CCR5)膜外第一、二胞外环特异性结合的短肽,并鉴定其与CCR5的结合能力。方法:在蛋白质数据库中查得大鼠CCR5第一、二胞外环的氨基酸序列,合成相应的线性短肽作为淘选的靶分子,利用噬菌体展示7肽文库进行3～4轮淘选,用ELISA法鉴定所选肽与靶分子的结合,并测定其与浓度的关系。结果:与CCR5第一、二胞外环特异性结合的噬菌体展示的短肽序列分别为GHWKVWL和HYIDFRW,ELISA鉴定呈阳性反应,且短肽与靶分子的结合具有浓度依赖性和可饱和性。结论:利用噬菌体展示技术成功获得了2条CCR5特异性结合的短肽,并在体外证明其可与CCR5第一、二胞外环具有结合能力。

引用

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页码：1225 / 1230

页数：6

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吴英萍 ;

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中国生物工程杂志, 2008, (11) :89-96

[4]

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Schnur, Einat ;

Kessler, Naama ;

Zherdev, Yuri ;

Noah, Eran ;

Scherf, Tali ;

Ding, Fa-Xiang ;

Rabinovich, Svetlana ;

Arshava, Boris ;

Kurbatska, Victoria ;

Leonciks, Ainars ;

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Rosen, Osnat ;

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Anglister, Jacob .

FEBS JOURNAL, 2013, 280 (09) :2068-2084

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Highton, Adrian ;

Faull, Alan ;

Wild, Martin ;

Brown, Dearg ;

Wells, Stuart ;

Shaw, John .

BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, 2012, 22 (04) :1655-1659

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Sozuer, E ;

Gursoy, S ;

Canoz, O ;

Artis, T ;

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Muhtaroglu, S .

AMERICAN JOURNAL OF SURGERY, 2006, 191 (01) :77-83

[7]

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Matsuzaki, K ;

Hokari, R ;

Kato, S ;

Tsuzuki, Y ;

Tanaka, H ;

Kurihara, C ;

Iwai, A ;

Kawaguchi, A ;

Nagao, S ;

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Nagata, K ;

Miura, S .

JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY, 2003, 18 (09) :1081-1088

[8]

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Paterlini, MG .

BIOPHYSICAL JOURNAL, 2002, 83 (06) :3012-3031