泽泻ISSR反应体系的建立与优化附视频

被引:18
作者
贺佳
丁小余
褚必海
刘冬扬
丁鸽
机构
[1] 南京师范大学生命科学学院
关键词
泽泻; ISSR反应体系; 建立与优化;
D O I
暂无
中图分类号
S567.219 []; Q943.2 [植物基因工程];
学科分类号
1008 ; 071007 ; 090102 ;
摘要
以四川泽泻为实验试材,采用改进的CTAB法提取了泽泻的高质量总DNA模板,克服了泽泻中所富含的酚类物质的影响.对泽泻ISSR反应体系中各个主要影响因子进行了优化和筛选,建立了标记位点清晰、稳定、重复性好、可用于泽泻ISSR-PCR分析的最适反应体系,它们是:25μL PCR反应体系中,10×Taq酶配套缓冲液,1U Taq DNA聚合酶,1.8~2.0 mmol/L MgC l2,100μmol/L dNTP,0.3μmol/L引物,DNA模板约10~20 ng,退火温度在52~60℃;为进一步研究泽泻居群的ISSR分子标记鉴别奠定了基础.
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