内质网应激-自噬参与葫芦素E诱导的结肠癌细胞凋亡

被引:4
作者
随何欢
赵海霞
朱丽莎
唐春梅
梁婧
苏强
机构
[1] 南充市中心医院·川北医学院第二临床医学院药学部·个体化药物治疗南充市重点实验室
关键词
内质网应激; 自噬; 葫芦素E; 结肠癌; 结肠癌细胞HT-29; 凋亡;
D O I
暂无
中图分类号
R285 [中药药理学];
学科分类号
100806 [中药药理学];
摘要
目的观察内质网应激和自噬反应对葫芦素E(CuE)诱导人结肠癌细胞系HT-29凋亡的作用。方法采用0.001、0.01、0.1、1、10μmol/L的CuE分别处理培养的HT-29细胞24、48及72 h,对照组仅用DMEM培养液。Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞分析法检测细胞凋亡,蛋白免疫印迹法检测内质网应激相关蛋白CHOP、Grp78以及自噬相关蛋白Beclin1、LC3表达水平。结果 Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞分析结果表明,随着CuE浓度升高,作用时间延长,凋亡细胞占总细胞比例明显升高(P<0.05),呈时间与剂量依赖性。蛋白印迹分析结果显示,用CuE处理HT-29细胞24 h后,与对照组相比,内质网应激相关蛋白CHOP及Grp78蛋白表达明显升高(P<0.05),自噬相关蛋白Beclin1表达逐渐增(P>0.05),胞浆型LC3(LC3-Ⅰ)发生酶解,转变为自噬体膜型LC3-Ⅱ,且LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值大小呈现出先上升(P<0.05)后下降(P>0.05)的趋势。结论内质网应激和自噬反应参与介导了CuE引起的人结肠癌细胞HT-29凋亡,其可能是CuE诱导结肠癌细胞凋亡的重要途径。
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