乳糖诱导D塔格糖3差向异构酶基因在大肠杆菌中的表达

被引：5

作者：

贾敏 ^{[1
,2
]}

江波 ^{[1
]}

张晓鸣 ^{[2
]}

沐万孟 ^{[1
]}

张涛 ^{[1
]}

缪铭 ^{[1
]}

周榴明 ^{[3
]}

机构：

[1] 江南大学食品科学与技术国家重点实验室

[2] 江南大学食品学院

[3] 罗盖特美国公司

来源：

食品工业科技 | 2013年 / 34卷 / 13期

基金：

国家自然科学基金重点项目;

关键词：

D-塔格糖3-差向异构酶; 乳糖; IPTG; 诱导表达;

D O I：

10.13386/j.issn1002-0306.2013.13.001

中图分类号：

Q93 [微生物学];

学科分类号：

071005 ; 100705 ;

摘要：

以D-塔格糖3-差向异构酶高效表达菌株BL21(DE3)/pET22b-cbdte为研究对象,考察乳糖作为诱导剂诱导D-塔格糖3-差向异构酶在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的可行性。在摇瓶发酵条件下,从诱导时机、诱导剂浓度、诱导时间及诱导温度等四个方面,研究诱导条件对目的蛋白表达的影响。结果表明,工程菌培养至对数生长中期OD值为1.0左右后,加入终浓度为5g/L的乳糖,于20℃的条件下诱导7h,可获得最大酶活。与异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)最适诱导条件相比,优化后的乳糖诱导酶活提高82.7%,可溶性目的蛋白的表达量提高99.5%,菌体生物量提高30.5%。研究结果为乳糖作为诱导剂应用于D-塔格糖3-差向异构酶的工业化生产提供有益的参考和借鉴。

引用

收藏

页码：143 / 146+152 +152

页数：5

相关论文

共 12 条

[1] Clostridium bolteae ATCC BAA-613 D-塔格糖3-差向异构酶的诱导表达、纯化及活性研究 [J].

储菲菲 ;

沐万孟 ;

邢庆超 ;

周榴明 ;

张涛 ;

江波 .

食品工业科技, 2012, 33 (07) :198-201+392

[2] 蚓激酶基因F238在大肠杆菌中的可溶性表达 [J].

王晓娟 ;

黎明 ;

高伟 ;

赵洪坤 ;

杜连祥 ;

路福平 .

工业微生物, 2011, 41 (01) :5-8

[3] 乳糖诱导极耐高温木聚糖酶基因B在大肠杆菌中的表达 [J].

朱运平 ;

江正强 ;

李里特 .

食品与发酵工业, 2005, (04) :37-41

[4] 以乳糖为诱导剂的高密度发酵 [J].

褚仲梅 ;

申秀云 ;

刘现杰 ;

屈贤铭 .

中国医药工业杂志, 2001, (11) :11-13

[5] 乳糖作为诱导剂对重组目的蛋白表达的影响 [J].

张毅 ;

屈贤铭 ;

杨胜利 .

生物工程学报, 2000, (04) :464-468

[6] Study on the Postprandial Blood Glucose Suppression Effect of D-Psicose in Borderline Diabetes and the Safety of Long-Term Ingestion by Normal Human Subjects [J].

Hayashi, Noriko ;

Iida, Tetsuo ;

Yamada, Takako ;

Okuma, Kazuhiro ;

Takehara, Isao ;

Yamamoto, Takashi ;

Yamada, Koji ;

Tokuda, Masaaki .

BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY, 2010, 74 (03) :510-519

[7] Neuroprotective effect of D-psicose on 6-hydroxydopamine-induced apoptosis in rat pheochromocytoma (PC12) cells [J].

Takata, MK ;

Yamaguchi, F ;

Nakanose, Y ;

Watanabe, Y ;

Hatano, N ;

Tsukamoto, I ;

Nagata, M ;

Izumori, K ;

Tokuda, M .

JOURNAL OF BIOSCIENCE AND BIOENGINEERING, 2005, 100 (05) :511-516

[8] Efficient production of recombinant proteins in Escherichia coli using an improved L-arabinose-inducible T7 expression system [J].

Wang, ZW ;

Huang, WB ;

Chao, YP .

PROCESS BIOCHEMISTRY, 2005, 40 (09) :3137-3142

[9] High-level expression of a fungal pyranose oxidase in high cell-density fed-batch cultivations of Escherichia coli using lactose as inducer [J].

Kotik, M ;

Kocanová, M ;

Maresová, H ;

Kyslík, P .

PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION, 2004, 36 (01) :61-69

[10] A novel inhibitory effect of D-allose on production of reactive oxygen species from neutrophils [J].

Murata, A ;

Sekiya, K ;

Watanabe, Y ;

Yamaguchi, F ;

Hatano, N ;

Izumori, K ;

Tokuda, M .

JOURNAL OF BIOSCIENCE AND BIOENGINEERING, 2003, 96 (01) :89-91