葡萄籽提取物脂肪酶抑制活性筛选及抑制机理的研究

为了研究葡萄籽中对脂肪酶有抑制作用的活性成分,葡萄籽粉碎后用95%乙醇提取24h,提取液减压浓缩得乙醇浸膏,乙醇浸膏依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取后减压浓缩并冷冻干燥得相应提取物。采用猪胰脂肪酶抑制剂活性筛选模型对各组分进行活性筛选。葡萄籽氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水相提取物对脂肪酶抑制的IC50值分别为46.32、0.95、28.54、150.39mg/mL。初步探讨了葡萄籽乙酸乙酯提取物对胰脂肪酶的抑制机理:抑制剂与酶的活性部位作用,导致酶催化反应速率下降。通过实验测定了抑制常数Ki=0.94mg/mL。Dixon图和Lineweaver-Burk图的特征表明,该抑制剂对胰脂肪酶的抑制呈非竞争性抑制。