数字PCR在转基因水稻拷贝数鉴定中的应用

被引:11
作者
王永 [1 ,2 ]
兰青阔 [2 ]
赵新 [2 ]
陈锐 [2 ]
沈晓玲 [2 ]
李文 [3 ]
张耀中 [3 ]
李亮 [4 ]
王勤英 [1 ]
机构
[1] 河北农业大学植物保护学院
[2] 天津市农业质量标准与检测技术研究所
[3] 天津农学院
[4] 中国农业科学院生物技术研究所
关键词
转基因水稻; 目的基因拷贝数; 微流滴数字PCR;
D O I
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0756
中图分类号
Q943.2 [植物基因工程]; S511 [稻];
学科分类号
071007 ; 090102 ; 0901 ;
摘要
转基因作物中插入外源基因拷贝数等分子特征是转基因生物安全评价的重要内容,但是以往的拷贝数鉴定方法存在操作性差等不足,因此亟需操作简单且准确的鉴定方法。应用微流滴数字PCR方法鉴定转基因水稻中插入目的基因的拷贝数,测试方法的可行性。实验结果表明,4个重复样品的目的 /内标准基因的比值分别为674/662、516/541、737/759、528/571,均值为0.97,因此验证的目的基因拷贝数为1,与Southern杂交结果一致。微流滴数字PCR作为插入外源基因拷贝数鉴定的新方法,具有操作简单、准确度高、设计灵活等优点。
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