萝卜mRNA差异显示技术反应体系的优化及应用

被引:6
作者
张慧蓉
龚义勤
柳李旺
杨金兰
黄丹琼
李培
宋闲勇
机构
[1] 南京农业大学园艺学院作物遗传与种质创新国家重点实验室
关键词
萝卜; 差异显示技术; 体系优化; 应用;
D O I
10.15889/j.issn.1002-1302.2007.01.027
中图分类号
S631.1 [萝卜];
学科分类号
摘要
以萝卜品种短叶十三为材料,对影响mRNA差异显示(DDRT-PCR)反应体系的主要因子进行优化试验,最终确定了优化体系(15μl):随机引物0.5μmol/L,锚定引物1.0μmol/L,dNTPs 0.1~0.2 mmol/L,Mg2+1.5mmol/L,模板cDNA 15 ng,TaqDNA聚合酶0.9 U;并对PCR扩增程序中的复性温度进行梯度筛选,表明40℃较适合于萝卜mRNA差异显示(DDRT-PCR)反应体系。同时应用该优化体系分别对短叶十三花芽分化和扬花萝卜、春萝卜BYC抽薹过程中基因的差异表达进行初步分析。
引用
收藏
页码:76 / 80
页数:5
相关论文
共 14 条
  • [1] 芸苔属蔬菜重金属累积特性及抗Cd基因的差异表达与克隆.[D].王松良.福建农林大学.2004, 04
  • [2] 中棉所47及其亲本苗期根和叶基因差异表达研究
    邢朝柱
    赵云雷
    喻树迅
    张献龙
    郭立平
    苗成朵
    不详
    [J]. 中国农业科学 , 2005, (06) : 1275 - 1281
  • [3] 小麦T型细胞质雄性不育系、保持系mRNA差异显示及育性相关基因的研究
    朱昀
    赵宝存
    葛荣朝
    沈银柱
    黄占景
    [J]. 作物学报, 2005, (03) : 398 - 400
  • [4] 反转录差异显示技术及其方法的改进
    朱靖
    杜立新
    [J]. 动物医学进展, 2005, (01) : 19 - 21
  • [5] 用银染mRNA差异显示技术寻找不同生长阶段绵羊皮肤中差异表达基因
    崔建东
    赵宗胜
    李大全
    王建华
    王宏伟
    毛录山
    [J]. 中国草食动物, 2004, (03) : 11 - 14
  • [6] 结球白菜结球莲座期和包心期叶片mRNA差异表达研究
    郭晶心
    周乃元
    马荣才
    曹鸣庆
    [J]. 农业生物技术学报, 2003, (05) : 456 - 460
  • [7] mRNA差异显示技术及其在猪基因组研究中的应用
    潘佩文
    赵书红
    刘榜
    李奎
    彭中镇
    [J]. 畜牧与兽医, 2001, (03) : 38 - 40
  • [8] 小麦春化相关特异性PCR扩增体系的建立
    董爱香
    任江萍
    尹钧
    [J]. 山西农业大学学报, 2000, (03) : 205 - 207
  • [9] 银染mRNA差异显示方法的条件优化
    梁德勇
    王晓民
    崔振中
    徐国恒
    朱丽霞
    韩济生
    [J]. 中国神经科学杂志, 1999, (02) : 64 - 68
  • [10] 差异显示法克隆水稻抗白叶枯病相关蛋白激酶基因(英文)
    董海涛
    吴玉良
    程志强
    何祖华
    李德葆
    [J]. 浙江农业大学学报, 1998, (05) : 94 - 98+101