HPLC-FD法测定重性抑郁障碍患者血清酪氨酸、色氨酸和5-羟色胺

目的建立一种高效液相色谱-荧光法(HPLC-FD)同时测定重性抑郁障碍(MDD)患者血清中酪氨酸(Tyr)、色氨酸(Trp)和5-羟色胺(5-HT)的含量,并探讨其应用价值。方法血清标本去蛋白质后,取上清液直接测定。色谱柱采用AtlantisC18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相为0.1 mol/L KH2PO4∶甲醇(85∶15);流速为1.0 mL/min;荧光检测器激发波长和发射波长0～4 min分别为228 nm和306 nm,4～7.5 min为278 nm和338 nm,7.5 min后为285 nm和353 nm。用建立的方法检测MDD患者和健康人对照组血清Tyr、Trp和5-HT含量。结果 Tyr、5-HT和Trp的保留时间约为3、5和9 min,3者分离良好(R>1.5);线性范围分别为0.55～275.00、0.094～47.03和0.049～49.00μmol/L;最低检测限分别为0.014、0.024和0.005μmol/L;平均回收率分别为100.6%、99.3%和97.0%;日内、日间精密度均<5%。苯丙氨酸(Phe)、犬尿氨酸(Kyn)、犬尿喹啉酸(Kyna)等物质无干扰。MDD患者血清Tyr、Trp和5-HT含量均低于健康人对照组,5-HT/Trp比值明显降低,差异有统计学意义(P均<0.01)。结论建立的HPLC-FD方法简便、快速、特异性好,适用于临床检验与研究。测定血清中Tyr、Trp和5-HT含量对MDD的辅助诊断有一定价值。