增强型绿色荧光蛋白逆转录病毒载体的构建和表达

被引：7

作者：

傅建新

王玮

卢大儒

岑建农

陈子兴

机构：

[1] 苏州大学附属第一医院,苏州大学附属第一医院,复旦大学遗传学研究所,苏州大学附属第一医院,苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所苏州,江苏省血液研究所苏州,上海,江苏省血液研究所苏州,江苏省血液研究所苏州

来源：

中国实验血液学杂志 | 2000年 / 04期

关键词：

绿色荧光蛋白; 逆转录病毒载体; 基因表达; 基因转移; 报告基因; 载体构建;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

1001 ;

摘要：

逆转录病毒载体被广泛用作对造血细胞进行基因转移的工具 ,转导方法的改进有赖于应用可快速分析并被高效选择的基因标志。为此 ,我们克隆了增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因 ,并构建可表达EGFP的逆转录病毒载体LGSN ,通过脂质体转染和交互感染方法建立高滴度的逆转录产病毒细胞 ,用以分析对造血细胞标记EGFP基因的可行性。流式细胞术和荧光显微镜检测发现 ,EGFP病毒转录的GP +envAm12细胞和K5 62细胞均可发出稳定的绿色荧光信号 ,阳性率可分别达 97%和 86% ;聚合酶链反应分析显示LGSN转导细胞内有原病毒的整合。上述结果提示 ,作为新一代选择性标志 ,EGFP是适于研究对造血细胞基因转移与表达的报告基因 ,对促进人类基因治疗的研究有重要意义

引用

页码：261 / 265

页数：5

共 3 条

[1] 应用绿色荧光蛋白研究外源基因在造血细胞的表达调控 [J].