目的:建立一种快速、准确检测中成药及保健食品中非法添加38种糖皮质激素的方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS-MS),Acquity BEH-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相0.1%乙酸乙腈溶液(A)-0.1%乙酸水溶液(B)梯度洗脱,流速0.3 m L·min-1,柱温25℃,电喷雾电离(ESI),正离子扫描,多反应监测(MRM)模式测定38种糖皮质激素,通过比较MRM模式下各通道样品峰与对照品峰的分子离子峰、二级碎片离子峰、色谱保留时间等信息确定添加的化学药物,并根据外标法以质谱峰面积计算添加药物的准确量。结果:在上述色谱及质谱条件下,38种糖皮质激素分离度良好,方法检测限(LOD)0.3~1.6μg·L-1,定量限(LOQ)1.0~5.4μg·L-1,加样回收率在80.9%119.4%。结论:该方法简便、准确,灵敏度高,可用于中成药及保健品中非法添加糖皮质激素的检测。