改良手工显微切割法获取特定细胞提取高质量RNA

被引：1

作者：

周广彪 ^{[1
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胡盛平 ^{[1
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刘静文 ^{[1
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张可浩 ^{[1
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官兵 ^{[1
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吴名耀 ^{[2
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沈忠英 ^{[2
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杨捷生 ^{[3
]}

机构：

[1] 汕头大学医学院分子生物学中心

[2] 汕头大学医学院病理学教研室

[3] 汕头大学医学院肿瘤医院胸外科

来源：

中国生物化学与分子生物学报 | 2006年 / 03期

基金：

广东省自然科学基金; 教育部留学回国人员科研启动基金;

关键词：

食管癌; 组织固定; 显微切割; RNA提取;

D O I：

10.13865/j.cnki.cjbmb.2006.03.018

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

1001 ;

摘要：

探讨显微切割过程中有效保持RNA完整性的组织固定方法,建立一种简易的手工显微切割法.应用自制“T形板”辅助冰冻切片,100%无水乙醇一次性脱水固定,“排除切割法”获取目的细胞,用TRIzol提取RNA,琼脂糖凝胶电泳和RT-PCR分析RNA质量.“一步法”固定可长时间保存RNA的完整性;从食管癌标本5个特定阶段的细胞中提取的RNA,经电泳和RT-PCR分析均具有较高的质量.无水乙醇“一步法”固定,在显微切割的过程中可有效保持RNA的完整性;T形板和“排除切割法”简化了手工显微切割的操作,提取的RNA质、量均可满足后续分子水平研究的需要.

引用

页码：252 / 257

页数：6

共 20 条

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