DNA甲基化对Ki-67启动子转录活性的影响

被引：7

作者：

李望 ^{[1
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钱国伟 ^{[2
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徐为 ^{[2
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田卉 ^{[2
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李连涛 ^{[2
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刘俊杰 ^{[2
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陈菲菲 ^{[2
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李慧中 ^{[2
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章龙珍 ^{[2
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郑骏年 ^{[2
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机构：

[1] 江苏徐州医学院附属医院泌尿外科

[2] 江苏省肿瘤生物治疗重点实验室

来源：

中华实验外科杂志 | 2011年 / 06期

关键词：

DNA甲基化; Ki-67基因; 启动子; 转录活性;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

目的观察DNA甲基化对Ki-67启动子转录活性的影响。方法使用S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体,使用甲基化酶(M.SssI、M.HpaII、M.HhaI)诱导Ki-67启动子DNA片段发生不同程度的甲基化,将甲基化的启动子片段插入pGL3-Basic载体得到甲基化Ki-67启动子荧光素酶报告质粒,并以非甲基化Ki-67启动子荧光素酶报告质粒作为对照,分别转染正常细胞(HL-7702、HUVEC)和肿瘤细胞(A549、EJ、Kert-3、Hela和SGC-7901),使用双荧光素酶报告基因检测系统测定甲基化的Ki-67启动子在这些细胞中的转录活性。结果甲基化Ki-67启动子的转录活性均有不同程度的下降,其下降幅度依次为M.SssI处理组>M.HhaI处理组>M.HpaII处理组,其中M.SssI处理组启动子的转录活性几乎完全消失。结论 Ki-67启动子的甲基化抑制了其转录活性,抑制程度与DNA甲基化程度和甲基化位置有关。

引用

共 2 条

[1]

Ki-67启动子转录调控结构与功能研究 [J].

李中林 ;

钱国伟 ;

徐为 ;

李望 ;

张宝福 ;

刘俊杰 ;

陈菲菲 ;

田卉 ;

章龙珍 ;

郑骏年 .

中华实验外科杂志, 2010, (09)

[2]

Ki-67启动子的克隆及其转录活性 [J].

孙方浩 ;

郑骏年 ;

徐为 ;

刘晓昀 ;

张宝福 ;

宋文哲 ;

刘俊杰 ;

章龙珍 ;

顾玉明 ;

高超 ;

李望 ;

裴冬生 .

中华实验外科杂志, 2009, (01)

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