基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱仪检测KPC型碳青霉烯酶的研究

目的用基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱仪(matrix-assisted laserdesorption/ionizationtime-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)比较产KPC型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌在不同药物浓度下水解厄他培南的能力。方法收集浙江大学医学院附属第二医院临床分离的19株单产KPC肠杆菌科细菌,包括10株奇异变形杆菌,3株产气肠杆菌,2株黏质沙雷菌,2株弗劳地柠檬酸杆菌,1株肺炎克雷伯菌,1株阴沟肠杆菌;杭州市中医院分离的7株产KPC摩根摩根菌,以及上述7株摩根摩根菌和部分奇异变形杆菌(4株)的大肠埃希菌转移接合子。用MALDI-TOF MS检测产KPC肠杆菌科细菌水解厄他培南的能力。结果当厄他培南浓度为0.1g/L时,37株单产KPC型碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌在1.5 h内全部水解厄他培南,质谱图显示厄他培南所呈现的3个峰全部消失,灵敏度高达100%;当厄他培南浓度为0.3 g/L时,1.5 h组水解厄他培南的灵敏度为70.3%(26/37),2.5 h组为89.2%(33/37),3.5 h组为94.6%(35/37);当厄他培南浓度为0.5 g/L时,1.5 h组水解厄他培南的灵敏度为48.6%(18/37),2.5 h组为83.8%(31/37),3.5 h组为94.6%(35/37)。两独立样本非参数检验统计显示:厄他培南0.1 g/L组与0.3 g/L、0.5 g/L组之间的水解时间差异有统计学意义,而0.3 g/L与0.5 g/L组之间的水解时间差异无统计学意义;细菌组内数据统计显示,除奇异变形杆菌组与大肠埃希菌组之间差异有统计学意义外,其他各细菌组之间差异没有统计学意义。结论 MALDI-TOF MS操作简便,可快速检测产KPC型碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌,敏感率高,假阳性率低,适合微生物检验中用于产KPC型碳青霉烯酶的检测,推荐使用0.1 g/L的厄他培南作为水解底物来检测产KPC型肠杆菌科细菌。