胡萝卜抗冻蛋白基因克隆及植物表达载体构建

被引：26

作者：

尹明安

崔鸿文

樊代明

郭立

机构：

[1] 西北农林科技大学园艺学院!陕西杨陵

[2] 第四军医大学西京医院!西安

[3] 西北农林科技大学生命科学学院!陕西杨陵

来源：

西北农林科技大学学报(自然科学版) | 2001年 / 01期

关键词：

胡萝卜; 抗冻蛋白基因; 分子生物学;

D O I：

10.13207/j.cnki.jnwafu.2001.01.002

中图分类号：

Q789 [基因工程的应用];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

以胡萝卜品种 Autumn King的幼苗为材料 ,用 CTAB法提取其基因组 DNA,以 PCR ( Polym eraseChain Reaction)的方法在体外扩增出胡萝卜抗冻蛋白基因 ( afp) ,以 p UCm - T Vector为载体构建成胡萝卜 afp的克隆载体 p TAF,用 Eco R 消化重组质粒 p TAF使其线性化 ,再用 DNA聚合酶 Klenow大片段补平末端 ,然后用Xba 消化 ,获得一末端粘 ,一末端平的目的片段 ( afp)。植物表达载体 p BI12 1用 X ba 和 Sma 双酶切 ,获得一末端粘 ,一末端平的线性质粒。将目的片段与线性质粒在 T4DNA连接酶的作用下进行定向连接 ,构建成胡萝卜 afp的植物表达载体 p BAF

引用

页码：6 / 10

页数：5

共 7 条

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