SD-PMA-ddPCR检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌

被引：6

作者：

王静 ^{[1
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刘玉敏 ^{[1
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李春喜 ^{[1
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赵丽青 ^{[2
]}

秦燕 ^{[1
]}

张慧敏 ^{[1
]}

机构：

[1] 威海出入境检验检疫局检验检疫技术中心

[2] 山东出入境检验检疫局

来源：

微生物学通报 | 2016年 / 43卷 / 10期

关键词：

叠氮溴化丙锭; 脱氧胆酸钠; 微滴式数字PCR; 单核细胞增生李斯特氏菌;

D O I：

10.13344/j.microbiol.china.150746

中图分类号：

R155.5 [食品卫生与检验];

学科分类号：

100403 ;

摘要：

【目的】检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌活菌。【方法】利用脱氧胆酸钠(SD)对受损细胞预处理,然后使叠氮溴化丙锭(PMA)进入受损细胞与DNA发生共价交联,提取细菌基因组DNA进行微滴式数字PCR(dd PCR)检测。【结果】0.1%SD和5.0 mg/L PMA协同作用,可以有效抑制108 CFU/m L的单核细胞增生李斯特氏菌死菌DNA的PCR扩增。经过SD和PMA对样品预处理,dd PCR可以在死菌存在条件下,定量检测鸡肉中单核细胞增生李斯特氏菌活菌,消除了"假阳性"结果的出现。活菌灵敏度检测结果显示:SD-PMA-dd PCR的灵敏度为2.0 copies/20μL。SD-PMA-dd PCR方法精密度和稳定性良好。【结论】SD-PMA-dd PCR在检测食源性致病菌方面有巨大的发展空间。

引用

页码：2306 / 2313

页数：8

共 16 条

[1] 免疫磁珠捕获PCR快速检测单核细胞增生李斯特氏菌 [J].

李婧姮 ;

郭慧琴 ;

高晓强 ;

刘芳 ;

邱实 ;

李建武 ;

曾海娟 ;

刘兰 ;

宋春美 ;

刘箐 .

食品科学, 2015, 36 (12) :226-229

[2] 单增李斯特菌的食源性污染状况及检测方法 [J].

张加林 ;

杨林娴 .

医学理论与实践, 2012, 25 (08) :910-911

[3] 食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测方法研究进展 [J].

刘书花 ;

魏云波 ;

林小静 ;

李景超 .

现代农业科技, 2010, (19) :327-328

[4] 食品中单增李斯特菌的存在现状及检测方法研究进展 [J].

丁建英 ;

韩剑众 .

食品研究与开发, 2008, 29 (12) :171-174

[5] 全自动荧光酶免疫分析仪-国标法检测水产品中单核细胞增生李斯特氏菌的研究 [J].

林涛 ;

刘真真 ;

杨雪娇 ;

黄伟 ;

冯小军 .

中国卫生检验杂志, 2008, (04) :655-656

[6]

Development of an SD-PMA-mPCR assay with internal amplification control for rapid and sensitive detection of viable Salmonella spp., Shigella spp. and Staphylococcus aureus in food products[J] . Lijun Wang,Chenlian Ye,Hengyi Xu,Zoraida P. Aguilar,Yonghua Xiong,Weihua Lai,Hua Wei. Food Control . 2015

[7]

Rapid detection of viable Bacillus cereus emetic and enterotoxic strains in food by coupling propidium monoazide and multiplex PCR (PMA-mPCR)[J] . Fereidoun Forghani,Taimour Langaee,Mohammad Eskandari,Kun-Ho Seo,Mi-Ja Chung,Deog-Hwan Oh. Food Control . 2015

[8]

Rapid and accurate detection of viable Escherichia coli O157:H7 in milk using a combined IMS, sodium deoxycholate, PMA and real-time quantitative PCR process[J] . Lijun Wang,Ping Li,Zhihong Zhang,Qi Chen,Zoraida P. Aguilar,Hengyi Xu,Lin Yang,Feng Xu,Weihua Lai,Yonghua Xiong,Hua Wei. Food Control . 2014 (1)

[9] Digital Droplet PCR for Rapid Quantification of Donor DNA in the Circulation of Transplant Recipients as a Potential Universal Biomarker of Graft Injury [J].

Beck, Julia ;

Bierau, Sarah ;

Balzer, Stefan ;

Andag, Reiner ;

Kanzow, Philipp ;

Schmitz, Jessica ;

Gaedcke, Jochen ;

Moerer, Onnen ;

Slotta, Jan E. ;

Walson, Philip ;

Kollmar, Otto ;

Oellerich, Michael ;

Schuetz, Ekkehard .

CLINICAL CHEMISTRY, 2013, 59 (12) :1732-1741

[10]

Detection and quantification of chimerism by droplet digital PCR[J] . David George,Juliann Czech,Bobby John,Min Yu,Lawrence J. Jennings. Chimerism . 2013 (3)

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