流式微球联合检测炎症性因子IL-6、TNF-α和MCP-1方法学的建立

目的建立流式微球联合检测技术检测人血清中IL-6、TNF-α和单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的方法并对其进行性能评价。方法以包被在3种羧基化聚苯乙烯微球上的IL-6、TNF-α和MCP-1单克隆抗体作为捕获抗体,相应的生物素化单克隆抗体作为检测抗体,用双抗体夹心法检测血清标本中的IL-6、TNF-α和MCP-1含量。用正交试验对试验条件优化选择,用CLSI的有关规则进行方法学评价。结果检测IL-6、TNF-α、MCP-1的线性范围分别为1.52～3 333.33 pg/mL、1.52～1 111.11 pg/mL、4.57～3 333.33 pg/mL;灵敏度分别为1.13 pg/mL、1.07 pg/mL、2.52 pg/mL;低值、高值批内变异系数(CV)分别为1.98%和2.31%、2.90%和2.67%、2.92%和2.63%;批间CV分别为3.52%和4.17%、4.91%和4.27%、4.23%和3.70%;准确度相对偏倚分别为2.19%～3.66%、1.85%～2.53%、3.06%～5.15%;回收率分别为95.4%～101.5%、97.3%～104.2%、95.2%～104.3%;三酰甘油、胆固醇和胆红素对本法基本无干扰;本法与Flow Cytomix试剂盒检测结果无显著差异。用本法检测血清中IL-6、TNF-α、MCP-1参考值分别为2.68～6.16 pg/mL、4.10～8.80 pg/mL、23.27～82.73pg/mL。结论流式微球联合检测血清IL-6、TNF-α、MCP-1的分析性能良好,可实现IL-6、TNF-α、MCP-1的联合检测。