枸杞中IPP异构酶相关基因(IPI)的分离

被引:3
作者
张爱香 [1 ]
季静 [2 ]
王罡 [2 ]
抗艳红 [1 ]
机构
[1] 河北北方学院农学系
[2] 天津大学农业与生物工程学院
关键词
枸杞; 叶片; cDNA文库; IPI; 基因; 分离;
D O I
暂无
中图分类号
S567.19 [];
学科分类号
1008 ;
摘要
以宁夏枸杞叶片为材料,采用异硫氰酸胍-酚-氯仿法提取完整的总RNA,利用PolyATract mRNA I-solation System(Promega公司)分离mRNA,然后利用Universal RibocloneRcDNA Synthesis System(Pro-mega公司)合成双链cDNA,在cDNA末端连接上EcoRⅠ接头,并与λExCell载体连接,利用PackageneLambda DNA Packaging System进行包装,构建出滴度为2.78×105pfu/mL,重组效率为88.1%的枸杞叶片cDNA文库。用Digoxigenin(DIG)标记龙胆草IPI探针,并对枸杞叶片cDNA文库进行筛选,获得7个IPIcDNA阳性克隆。释放质粒后,进行酶切鉴定,IPI阳性克隆cDNA插入片段的大小为1.5 kb左右。
引用
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页数:4
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