一种基于PCR分析多样性的小鼠肠道微生物宏基因组提取方法附视频

被引：19

作者：

吴海 ^{[1
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周赛男 ^{[2
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郭纯 ^{[2
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谭周进 ^{[2
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蔡光先 ^{[2
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曾奥 ^{[1
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张华玲 ^{[1
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机构：

[1] 湖南中医药大学

[2] 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地

来源：

中国微生态学杂志 | 2012年 / 07期

关键词：

小鼠肠道菌群; 宏基因组DNA; PCR; 扩增核糖体限制性酶切片段分析;

D O I：

10.13381/j.cnki.cjm.2012.07.003

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

目的建立一种基于PCR分析分子多样性的小鼠肠道菌群宏基因组提取方法。方法比较、综合国内外小鼠肠道菌群宏基因组的提取方法后建立一种新方法,小鼠肠道内容物经丙酮洗涤,差速离心,溶菌酶、SDS裂解,CTAB处理,酚/氯仿抽提后可得到高质量的DNA,通过紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳、细菌通用引物PCR和扩增核糖体限制性酶切片段分析(ARDRA)等检测该方法的实用性。结果该方法获得的小鼠肠道菌群宏基因组DNA大小在23 kb左右,A260/A280在1.8～2.0,经细菌通用引物PCR后能得到适用于ARDRA的目的产物。结论该方法经济适用性较强,具备一定的应用价值。

引用

页码：648 / 651

页数：4

共 6 条

[1] 提取鼠肠道内微生物基因组DNA的方法研究 [J].