磁珠富集法筛选白鲢的微卫星分子标记

被引：26

作者：

鲁翠云 ^{[1
]}

孙效文 ^{[1
]}

曹洁 ^{[2
]}

梁利群 ^{[1
]}

机构：

[1] 中国水产科学院黑龙江水产研究所

[2] 大连水产学院

来源：

农业生物技术学报 | 2005年 / 06期

关键词：

磁珠富集; 白鲢; 微卫星;

D O I：

暂无

中图分类号：

S917.4 [水产动物学];

学科分类号：

0908 ;

摘要：

通过磁珠富集法筛选白鲢(Hypophthalmichtysmolitrix)的微卫星分子标记。从血液中提取白鲢大片段基因组DNA,限制性内切酶Sau3AI部分消化,使大部分片段介于400～900bp,低熔点琼脂糖凝胶回收。在筛选的基因组片段上连接1个20bp的双链接头,构建白鲢全基因组PCR文库,用生物素标记的微卫星探针(CA)15进行筛选,磁珠富集含有微卫星序列的DNA片段,获得含有微卫星的单链序列;将这些序列通过PCR扩增,连接pGEM-T载体,转化入感受态大肠杆菌(Escherichiacoli)DH5α,得到一个微卫星序列文库;又经同位素标记的微卫星探针(CA)15进行第2次筛选,获得149个阳性克隆,经测序分析,获得微卫星序列138个,这可用引物设计软件PrimerPremier5.0设计引物81对。

引用

页码：772 / 776

页数：5

共 6 条

[1] 长江中游水系鲢和草鱼群体mtDNA遗传变异的研究 [J].