一种简单、有效的适于PCR操作的放线菌DNA提取方法

被引：106

作者：

姜淑梅 ^{[1
]}

张龙 ^{[2
]}

戴世鲲 ^{[1
]}

李翔 ^{[1
]}

机构：

[1] 中国科学院南海海洋研究所

[2] 广东省农科院花卉研究所

来源：

生物技术 | 2007年 / 01期

基金：

广东省自然科学基金;

关键词：

放线菌; 基因组DNA提取; PCR; 16S DNA;

D O I：

10.16519/j.cnki.1004-311x.2007.01.013

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

目的:利用改良酶法发展了一种从微量(几百微升)发酵液中快速安全的提取放线菌基因组DNA的方法。方法:利用溶菌酶破壁,蛋白酶K和SDS除蛋白,成功提取较高质量的放线菌基因组DNA,所得的DNA可作为PCR反应的模板进行16SrRNA等基因有效扩增。结果:能从海绵和土壤分离的放线菌中成功提取基因组DNA。结论:该方法操作简单、费用低廉、不使用酚、氯仿等有毒害作用有机试剂,非常适于长期从事放线菌操作的研究人员。为大量放线菌菌株的快速鉴别、高通量筛选和系统分类研究创造了条件。

引用

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