禽流感病毒分型基因芯片的研制

被引：51

作者：

韩雪清 ^{[1
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林祥梅 ^{[1
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侯义宏 ^{[2
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吴绍强 ^{[1
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刘建 ^{[1
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梅琳 ^{[1
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贾广乐 ^{[1
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杨泽晓 ^{[1
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机构：

[1] 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所

[2] 荆楚理工学院生物工程系

来源：

微生物学报 | 2008年 / 09期

基金：

国家科技攻关计划;

关键词：

禽流感病毒; 分型; 基因芯片; 杂交; 检测;

D O I：

暂无

中图分类号：

S852.659.5 [];

学科分类号：

摘要：

【目的】禽流感病毒是一种全球重要的人和动物呼吸道病病原,快速确定其不同亚型对于全球流感监测具有重要的意义。本研究意在研制一种可同时鉴定禽流感病毒所有亚型的方法。【方法】根据GenBank上已发表的禽流感病毒不同亚型(16个HA亚型和9个NA亚型)的基因序列,设计合成了25对特异性引物和1对通用引物,然后以各亚型病毒的参考株RNA作为模板,建立扩增不同亚型的多重RT-PCR方法。参考各亚型病毒靶cDNAs区域的保守序列设计了52条亚型特异的探针,进而利用扩增的各亚型病毒的靶cDNAs对其特异性进行评价。在此基础上,将设计好的探针点制到处理好的玻片上,制备了禽流感病毒分型鉴定基因芯片,结合所建立的扩增不同亚型的多重RT-PCR方法,开发了禽流感病毒亚型鉴定基因芯片试剂。利用收集自49个地区的2653份标本对其特异性和敏感性进行了初步评价。【结果】用于评价的各亚型参考毒株均出现良好的特异性杂交信号,检测的敏感度可达2.47PFU/mL或2.5ng靶DNA片段,而且与禽类常见的IBV、NDV等6种病毒均无交叉反应。【结论】证明该病毒分型基因芯片具有良好的特异性、敏感性。

引用

页码：1241 / 1249

页数：9

共 4 条

[1]

猪流感病毒分型基因芯片的建立和初步应用 [J].