枸杞中番茄红素β-环化酶基因(LycB)的分离

被引：3

作者：

张爱香

季静

王罡

张艳贞

刘会清

机构：

[1] 河北北方学院南校区

[2] 中国人民解放军军需大学植物基因工程研究中心

[3] 河北北方学院南校区河北张家口

[4] 吉林长春

[5] 河北张家口

来源：

中国农学通报 | 2005年 / 01期

关键词：

枸杞; 叶片; cDNA文库; LycB; 基因; 分离;

D O I：

暂无

中图分类号：

S567.1 [木本];

学科分类号：

1008 ;

摘要：

以宁夏枸杞叶片为材料,采用异硫氰酸胍-酚-氯仿法提取完整的总RNA,利用PolyATractmRNA Isolation System(Promega公司)分离mKNA,然后利用Universal Riboclone RcDNA SynthesisSystem(Promega公司)合成双链cDNA,在cDNA末端连接上EcoR Ⅰ接头,并与λExCell载体连接,利用Packagene Lambda DNA Packaging System进行包装,在国内外首次构建出滴度为2.78×10 5pfu／ml,重组效率为88.1％的枸杞叶片cDNA文库。用Digoxigenin(DIG)标记龙胆草LycB探针,并对枸杞叶片cDNA文库进行筛选,获得5个LycB cDNA阳性克隆。释放质粒后,进行酶切鉴定,LycB阳性克隆cDNA插入片段的大小为2.1kb左右。为利用基因工程手段来调控类胡萝卜素的生物合成奠定了基础。

引用

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页数：4

共 5 条

[1] 类胡萝卜素合成的相关基因及其基因工程 [J].