大鼠骨髓内皮祖细胞的分离、培养及鉴定

被引：3

作者：

李巧 ^{[1
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王志刚 ^{[1
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冉海涛 ^{[1
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钟世根 ^{[1
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李兴升 ^{[2
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凌智瑜 ^{[3
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机构：

[1] 重庆医科大学附属第二医院超声影像学研究所

[2] 重庆医科大学附属第二医院老年科

[3] 重庆医科大学附属第二医院心内科

来源：

中华生物医学工程杂志 | 2009年 / 06期

关键词：

骨髓细胞; 内皮细胞; 干细胞; 分化; 诱导;

D O I：

暂无

中图分类号：

R329 [人体组织学];

学科分类号：

摘要：

目的研究大鼠骨髓来源的内皮祖细胞(EPC)的分离、鉴定、培养方法以及向内皮细胞分化的诱导条件。方法密度梯度离心法分离SD大鼠股骨及胫骨单个核细胞,经差速贴壁后取2次贴壁细胞置于纤连蛋白铺被的培养板中。在血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及表皮生长因子(EGF)诱导下培养两周,观察其形态学改变,以免疫细胞化学染色及DilacLDL、FITC-UEA-1双荧光染色法对其进行鉴定。结果贴壁细胞呈现铺路石、团簇样生长,呈梭形、线样排列特殊形态。免疫细胞化学结果显示,贴壁细胞CD133、CD34、Flk-1、血管性假血友病因子(vWF)在不同时段呈阳性表达。诱导培养第2天,CD133阳性表达率为(79.4±4.5)%。自诱导培养的第6天开始,Flk-1与vWF呈高表达,阳性率为(74.2±3.5)%和(72.2±4.3)%。结论用Percoll密度梯度离心法在VEGF、bFGF及EGF培养体系下可以获得较高纯度的EPC,该细胞具有内皮细胞的特性,经过体外诱导可以分化为内皮细胞。

引用