NGAL基因新型TPA反应元件结合蛋白的研究

被引：1

作者：

孟令英 ^{[1
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缪成贵 ^{[2
]}

杜则澎 ^{[2
]}

蔡唯佳 ^{[1
]}

许丽艳 ^{[1
]}

李恩民 ^{[2
]}

机构：

[1] 汕头大学医学院肿瘤病理研究室

[2] 汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室

来源：

生物化学与生物物理进展 | 2008年 / 06期

基金：

广东省自然科学基金;

关键词：

NGAL基因; 寡核苷酸DNA亲和层析; MALDI-TOF-MS; TPA反应元件; TPA反应元件结合蛋白; TPA反应性;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q75 [分子遗传学];

学科分类号：

071007 ;

摘要：

以往研究发现, 食管癌细胞的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL)基因的过表达具有明显的 12-O- 十四烷酰佛波醇 -13- 醋酸酯(12-O-tetradecanoyl phorbol-13-acetate, TPA)诱导性, 在启动子- 152～- 60 区段存在着一种新型的 TPA 反应元件(TPA response element, TRE), 但是该元件的结合蛋白尚未被鉴定出来. 采用寡核苷酸 DNA 亲和层析法(oligonucleotide trapping)从食管癌细胞中分离纯化了 NGAL 基因 TRE 结合蛋白; 经 SDS-PAGE进一步分离, 银染显示目标蛋白带. 人工切取各目标蛋白带进行 MALDI-TOF-MS 分析, 通过 Mascot 软件搜索 NCBI 数据库, 根据蛋白质的功能、细胞定位和分子质量大小等指标确定 8 个核蛋白因子: C19、KIAA1949、TDRD1、RXR β、FAM54A、KLF15、KLF10 和 YY-1. 最后, 利用 RT-PCR 验证了这些核蛋白因子表达的 TPA 反应性, 结果表明 C19、KIAA1949、TDRD1、RXR β和 KLF15 等编码基因的转录表现出了明显的 TPA 反应性, 提示可能是食管癌细胞中应答 TPA刺激, 参与 NGAL 基因过表达的转录激活因子.

引用

页码：661 / 670

页数：10

共 13 条

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