番茄1──氨基环丙烷羧酸(ACC)合成酶基因的反义RNA──核酶嵌合DNA序列的构建

被引:9
作者
仇润祥
扈廷茂
王永胜
张晓海
刘中大
机构
[1] 内蒙古大学生物系!呼和浩特,,内蒙古大学生物系!呼和浩特,,内蒙古大学生物系!呼和浩特,,内蒙古大学生物系!呼和浩特,,内蒙古大学生物系!呼和浩特,
关键词
番茄; ACC合成酶; 反义RNA-核酶嵌合基因;
D O I
10.16288/j.yczz.1999.02.001
中图分类号
Q943 [植物细胞遗传学];
学科分类号
071007 ; 090102 ;
摘要
根据番茄ACC合成酶基因(LE—ACC2)DNA序列,以番茄(LycopersiconesculentumMill)果实的总DNA为模板,利用PCR技术扩增得到预期大小的该基因编码区内部分DNA序列,插入到质粒载体pGEM—3zf(+)的BamHⅠ和HindⅢ位点之间后转化E.coliDH—5α,可选出重组子pRE,经酶切,PCR及DNA序列分析证明克隆成功;将pRE上的目的DNA序列以反义方式构建到我室已合成并克隆的含核酶DNA序列的重组质粒pRⅠ的BamHⅠ和HindⅢ之间,构成含有反义RNA-核酶嵌合DNA序列的重组质粒pREⅠ,经酶切及序列分析,结果与预期一致.
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