结球甘蓝RAPD反应条件的优化

被引:4
作者
刘冲
薄天岳
葛才林
任云英
陈锦秀
杨晓锋
机构
[1] 上海市农业科学院园艺研究所
[2] 上海市设施园艺技术重点实验室
[3] 扬州大学农学院
关键词
甘蓝; RAPD; 体系优化;
D O I
暂无
中图分类号
S635.1 [结球甘蓝];
学科分类号
摘要
以甘蓝(Brassicaoleraceavar.capitata)基因组DNA为模板,比较筛选RAPD扩增体系的各影响因素,优化了甘蓝的RAPD反应体系,调整了扩增程序。该体系反应总体积为20μL,其中25mmol/LMgCl22.0μL,10×PCRBuffer2.0μL,10mmol/LdNTP0.5μL,5U/μLTaqE0.5μL,20ng/μLPrimer1.5μL,10ng/μL模板DNA3μL,灭菌双蒸水10.5μL。适宜的扩增程序为:94℃预变性5min;94℃变性1min,37℃复性1min,72℃延伸1.5min,40个循环;72℃延伸10min后15℃保存。
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