中国流行株C基因型HBV稳定复制表达小鼠模型的建立

被引:4
作者
杨悦 [1 ,2 ]
高俪 [3 ]
许智慧 [2 ]
余双庆 [3 ]
李瑞生 [2 ]
黄鹏宇 [2 ]
乔艳 [1 ,2 ]
李进 [2 ]
董小岩 [3 ]
吴小兵 [3 ]
刘妍 [2 ]
徐东平 [2 ]
机构
[1] 桂林医学院研究生院
[2] 解放军医院全军传染病研究所/临床研究管理中心
[3] 五加和分子医学研究所有限公司
关键词
乙型肝炎病毒; 基因型; 模型,动物;
D O I
暂无
中图分类号
R-332 [医用实验动物学]; R512.62 [];
学科分类号
100402 [劳动卫生与环境卫生学];
摘要
目的构建稳定复制中国流行株C基因型HBV的小鼠模型。方法将携带1.3倍C基因型HBV基因组(adr血清型)的重组腺相关病毒r AAV8-1.3HBV-C转导人肝癌细胞Hu H7,采用ELISA法评估HBV抗原(HBs Ag、HBe Ag)在肝癌细胞中的表达。筛选高表达的重组病毒,经尾静脉注射入6~8周龄C57BL/6小鼠体内,建立HBV-C复制小鼠模型(实验组,n=8);同时建立文献已报道HBV-D复制小鼠模型(对照组,n=7,r AAV8-1.3HBV-D,ayw血清型)。动态监测两组小鼠血清(眼底静脉丛采血)HBV DNA载量和HBs Ag、HBe Ag的抗原表达量;于第9周处死小鼠,HE染色观察肝组织病理改变,免疫组化染色分析HBs Ag和HBc Ag的表达。结果重组病毒r AAV8-1.3HBV-C体外转导人肝癌细胞Hu H7,72h后细胞上清中可检测到HBs Ag和HBe Ag的表达。小鼠注射重组病毒后第2、3、5、7、9周,血清HBV DNA存在稳定复制,血清HBe Ag表达水平较稳定,但血清HBs Ag表达存在波动。两组小鼠肝组织未见明显的炎性细胞浸润及组织结构异常,但可检测到HBs Ag和HBc Ag蛋白。结论利用高嗜肝性重组8型腺相关病毒载体携带1.3倍C基因型HBV基因组体内转导C57BL/6小鼠,成功地建立了稳定复制并持续表达C基因型HBV的小鼠模型。
引用
收藏
页码:793 / 797
页数:5
相关论文
共 14 条
[1]
HBsAg阴性患者HBV隐匿性感染:110例临床分析 [J].
袁琴 ;
伍春霞 ;
刘飞飞 ;
罗旗 ;
刘何蕾 ;
李成敏 ;
郑洁 ;
罗舒文 ;
张聪 ;
曾爱中 .
解放军医学杂志, 2015, (02) :133-136
[2]
后天感染河南樱桃谷鸭乙型肝炎病毒模型的建立 [J].
臧利敏 ;
吴学炜 ;
赵雪杰 ;
方先珍 ;
杨晓瑞 ;
王庆端 ;
常俊标 ;
郑立运 .
郑州大学学报(医学版), 2013, 48 (06) :732-735
[3]
用重组8型腺相关病毒载体介导的乙型肝炎病毒持续感染小鼠模型评价核苷类似物的抗病毒效果.[J].王国婧;王刚;董小岩;田文洪;尉迟捷;魏国超;孟红;吴小兵;.生物工程学报.2013, 01
[4]
HBV基因组A1846T变异对病毒复制力及核心启动子活性的上调作用研究 [J].
江玲 ;
许智慧 ;
刘妍 ;
李晓东 ;
姚伟明 ;
李韦杰 ;
戴久增 ;
辛绍杰 ;
徐东平 .
解放军医学杂志, 2013, 38 (01) :10-14
[5]
1.3拷贝C基因型HBV转基因小鼠的制备及检测 [J].
陈媚娟 ;
尤玉琴 ;
刘光泽 ;
佟明华 ;
黎经纬 ;
李秀梅 ;
孔祥平 .
解放军医学杂志, 2011, (09) :967-969
[6]
HBV转基因小鼠血液生理生化指标检测分析 [J].
郑凤娇 ;
傅泳航 ;
刘光泽 ;
张建 ;
李秀梅 ;
陈媚娟 ;
孔祥平 .
解放军医学杂志, 2011, 36 (09) :970-972
[7]
中国流行的C基因型HBV稳定复制表达细胞系的建立 [J].
王琳 ;
刘文 ;
刘妍 ;
纪冬 ;
思兰兰 ;
钟彦伟 ;
徐东平 .
解放军医学杂志, 2010, 35 (12) :1425-1428
[8]
高嗜肝性8型重组腺相关病毒体内转导法制备乙型肝炎病毒持续感染小鼠模型.[J].董小岩;尉迟捷;王刚;田文洪;陆月;张风卫;王文;王岳;谭文杰;吴小兵;.病毒学报.2010, 06
[9]
1.1倍长乙型肝炎病毒基因组在Huh7细胞中的高效复制和表达 [J].
蒋林彬 ;
施建飞 ;
刘妍 ;
刘文 ;
思兰兰 ;
钟彦伟 ;
徐东平 .
解放军医学杂志, 2010, (06) :635-638
[10]
水动力注射法构建乙型肝炎病毒感染小鼠模型 [J].
刘霜 ;
谢清 ;
段钟平 .
胃肠病学和肝病学杂志, 2009, 18 (09) :840-842