肉类中大肠杆菌O157:H7多重PCR检测方法的建立

被引:19
作者
徐晓可
吴清平
周艳红
张菊梅
杨小鹃
机构
[1] 广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室
基金
广州市科技计划项目; 广东省科技计划;
关键词
大肠杆菌O157:H7; 多重PCR; 肉类;
D O I
10.13344/j.microbiol.china.2008.04.032
中图分类号
S851.43 [];
学科分类号
摘要
以编码大肠杆菌O157抗原的rfbE基因、编码H7抗原的fliC基因以及编码毒力因子的eaeA基因为靶基因,选择3对引物,建立并优化了检测大肠杆菌O157:H7的多重PCR体系,扩增产物分别为291bp、625bp、368bp,采用30株细菌验证了该多重PCR具有特异性。PCR检测的灵敏度在DNA水平上达到91.35pg;在存在干扰菌鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)的情况下,当起始污染量为1.4CFU/mL时,37℃培养6h即可检出。在30份肉类样品中,有3份检出了大肠杆菌O157:H7。本研究建立的多重PCR方法可特异、灵敏地实现对大肠杆菌O157:H7的检测。
引用
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