转IL-1Ra和TGF-β1基因治疗兔骨性关节炎的体外实验研究

被引：19

作者：

张平 ^{[1
]}

蔡道章 ^{[2
]}

刘斌 ^{[2
]}

钟志宏 ^{[1
]}

潘永谦 ^{[1
]}

张振山 ^{[1
]}

机构：

[1] 广州医学院第三附属医院骨外科

[2] 中山大学附属第三医院骨外科

来源：

中华关节外科杂志(电子版) | 2011年 / 5卷 / 03期

基金：

广东省科技计划;

关键词：

受体,白细胞介素1; 转化生长因子; 基因转移技术; 软骨细胞;

D O I：

暂无

中图分类号：

R684.3 [关节炎];

学科分类号：

100220 [骨科学];

摘要：

目的探讨重组人IL-1Ra和TGF-β1双基因在体外对兔骨性关节炎软骨退变的治疗效果。方法取新西兰大白兔关节软骨,经消化分离,软骨细胞以1.5×105/ml浓度培养于6孔培养板。软骨细胞分为5组,转染IL-1Ra组、转染TGF-β1组、转染IL-1Ra+TGF-β1双基因组、未转染组、空白组。上述转染组均以Lipofectamine TM 2000 Reagent脂质体为转染媒介。各组加入软骨块,除空白组外,其余各组均加入20ngIL-1β。于第6天后每组各取4孔1.5ml培养基,ELISA法检测TGF-β1和IL-1Ra的含量,RIA法检测IL-1β和TNF-α的含量。收集软骨块做HE染色、阿尔新蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化检测等组织学观察。结果转染组IL-1Ra或TGF-β1有较高的表达水平;转染组IL-1β和TNF-α的表达水平降低,在双基因组降低最明显,与单基因组之间有显著性差异(P<0.05)。转基因组基质染色均比未转染组着色较深。在双基因组软骨细胞排列尚整齐,细胞数量多,基质深染。结论联合基因治疗效果优于单基因,为体外骨性关节炎的基因治疗提供实验基础。

引用

页码：335 / 342

页数：8

共 5 条

[1]

骨关节炎的遗传基因及基因治疗附视频 [J].