多重环介导等温扩增快速检测沙门菌、副溶血弧菌和单核细胞增生性李斯特菌方法的建立

目的建立能够同时检测沙门菌、副溶血弧菌(VPH)和单核细胞增生性李斯特菌(LM)的多重环介导等温扩增(mL AMP)方法。方法分别针对沙门菌bcfD基因、VPH的tlh基因和LM的iap基因设计mL AMP引物,以LAMP进行单重LAMP检测。实时浊度监测扩增结果,优化引物浓度配比,进而建立此3种食源性致病菌的mL AMP检测体系,以PCR检测灵敏性作为比较,进行特异性和灵敏性分析。结果实时浊度监测表明,该mL AMP体系具有良好特异性,可在45 min内一次性检测以上3种致病菌,且无非特异扩增产生。这3种菌的检测最低限分别为300 fg/μl、4.2 pg/μl和4.5 pg/μl,与PCR检测灵敏度相当。结论该多重LAMP可同时检测食品中的沙门菌、VPH和LM,可作为大规模样品的初筛或传统方法的辅助方法,用于快速判定样品中是否含有这3种致病菌。