单增李斯特菌与志贺氏菌多重PCR检测技术的建立

被引：21

作者：

徐伟

刘军

李素芳

机构：

[1] 中国计量学院生命科学学院

来源：

中国食品学报 | 2009年 / 9卷 / 01期

关键词：

多重PCR; 单增李斯特菌; 志贺氏菌; 食品检测;

D O I：

10.16429/j.1009-7848.2009.01.025

中图分类号：

TS207.4 [食品的微生物检验];

学科分类号：

摘要：

目的:为食品、卫生行业提供一种简便、灵敏、快速,并且特异性强的单增李斯特菌(Listeria monocyto-genes)与志贺氏菌(Shigella)多重PCR检测方法。方法:根据单增李斯特菌转录调节子基因prfA、志贺氏菌侵袭性质粒抗原H基因ipaH筛选出引物;优化多重PCR的引物浓度、退火温度及Mg2+等条件,分析单一PCR及多重PCR的特异性、灵敏度;结合24h增菌培养,确定多重PCR检测人工污染脱脂灭菌乳的检出限。结果:多重PCR扩增出了预计的PCR产物,即单增李斯特菌(274bp)和志贺氏菌(421bp)。该方法的灵敏度:78pg单增李斯特菌基因组DNA、7.5pg志贺氏菌基因组DNA。多重PCR检测人工污染脱脂灭菌乳,单增李斯特菌与志贺氏菌的灵敏度分别为2cfu/25mL和1.6cfu/25mL。结论:该方法在食品、卫生行业具有很好的应用和开发前景。

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页码：201 / 207

页数：7

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