副溶血性弧菌免疫磁珠偶联条件优化及捕获性能评价

被引:7
作者
黄韵仪
胡连花
孙力军
王雅玲
伍慧琦
刘阳
机构
[1] 广东海洋大学食品科技学院
关键词
免疫磁珠; 副溶血性弧菌; 血清蛋白; 偶联条件; 富集;
D O I
暂无
中图分类号
R378 [病原细菌];
学科分类号
摘要
优化磁珠和副溶血性弧菌血清的偶联条件,并对其捕获性能进行评价。以考马斯亮蓝法测定磁珠偶联血清蛋白量,考察磁珠型号、粒径大小、活化剂的浓度、偶联温度、时间等对偶联效果的影响,并利用平板计数法评价免疫磁珠的捕获性能。选择S型磁珠,活化剂采用EDC和NHS溶液(浓度均为0.005 g/L)各0.1 mL,25℃、24 h进行偶联,血清蛋白和磁珠结合效率最高;在优化的条件下制备的免疫磁珠能特异性富集副溶血性弧菌,最低检测限为5 cfu/100 mL。利用优化的条件可以明显提高磁珠与血清蛋白的结合效率,制备的免疫磁珠具有较好的特异性,其检测限和准确度都大幅提高,为副溶血性弧菌免疫磁珠试剂盒的研制奠定了基础。
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