转基因小鼠乳腺表达人乳过氧化物酶的初步研究

被引:5
作者
余珊珊
王毅彰
于舒洋
李宁
机构
[1] 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室
[2] 安阳师范学院地理系
[3] 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室 北京
[4] 河南安阳
[5] 北京
关键词
人乳过氧化物酶(hLPO); 转基因小鼠; 显微注射;
D O I
暂无
中图分类号
R346 [];
学科分类号
1001 ;
摘要
从人基因组PAC文库中筛选出人乳过氧化物酶(hLPO)基因,利用长片段PCR的方法获得hLPO基因5'端约3kb片段,通过酶切方法获得hLPO基因3'端约27kb片段,将这两部分拼接并克隆到乳腺特异性表达载体pBC1上,构建以山羊β-casein启动区指导的hLPO的转基因表达载体pBC1-hLPO。利用显微注射的方法获得28只F0代小鼠,经PCR检测和Southern杂交分析证实,有5只小鼠(4♂,1♀)为整合hLPO基因的转基因阳性小鼠,整合率为17.86%,整合拷贝数在1至5之间。利用SDS-PAGE凝胶电泳和Westernblot印迹分析F0、F1代共3只雌性转基因小鼠乳样,结果表明hLPO重组蛋白的特异条带不明显。
引用
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