泥蚶(Tegillarca granosa)cDNA文库的构建及铁结合蛋白基因(Ferritin)序列分析

被引：13

作者：

贺静静 ^{[1
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李晔 ^{[1
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李太武 ^{[1
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苏秀榕 ^{[1
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王孟前 ^{[1
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李松伟 ^{[1
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周军 ^{[1
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马斌 ^{[1
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李强芳 ^{[2
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机构：

[1] “应用海洋生物技术”教育部重点实验室(宁波大学)宁波大学生命科学与生物工程学院

[2] 广东省阳江市海洋与渔业局

来源：

海洋与湖沼 | 2009年 / 40卷 / 03期

关键词：

cDNA文库; 序列分析; 泥蚶; 铁结合蛋白基因;

D O I：

暂无

中图分类号：

S917.4 [水产动物学];

学科分类号：

0908 ;

摘要：

取正常泥蚶肌肉组织获得总RNA,纯化mRNA后,利用含SfiⅠ酶切位点的CDSⅢ引物逆转录合成cDNA第一链,通过LD-PCR合成cDNA双链,经胶回收除去短片段,与pDNR-LIB载体进行连接,电转化到大肠杆菌DH10B中,构建形成原始文库,进行滴度测试和重组率鉴定。结果表明原始文库的滴度为3.17×105cfu/ml,重组率为86.3%,插入片段多在500—2500bp间。随机挑选458个克隆测序,经分析获得94种已知基因及87种未知基因。其中包括铁结合蛋白(Ferritin)的全长cDNA序列。该基因序列全长895bp,5’-端非编码区为163bp,3’-非编码区为213bp,开放阅读框为519bp,编码172个氨基酸。推测其蛋白分子量和等电点分别为20kDa和4.89。氨基酸序列与皱纹盘鲍、太平洋牡蛎、血红扇头蜱、文昌鱼、中华蟾蜍、非洲爪蟾、小家鼠以及人等的同源性有62%—82%。比对结果表明,铁结合蛋白基因在动物进化中高度保守。

引用

页码：289 / 295

页数：7

共 19 条

[1] 可口革囊星虫(Phascoloma esculenta)铁结合蛋白基因的研究 [J].