黑曲霉原生质体的制备、再生及转化条件

被引：31

作者：

姚婷婷

王正祥

机构：

[1] 江南大学工业生物技术教育部重点实验室

来源：

食品与生物技术学报 | 2006年 / 04期

关键词：

黑曲霉; 原生质体; 制备; 再生; 转化;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

为了建立原生质体介导的黑曲霉转化系统,研究了菌龄、酶系统、渗透压稳定剂、酶解时间对葡萄糖淀粉酶生产菌株黑曲霉CICIM F0410原生质体形成与再生的影响。结果表明,培养4 d的幼嫩菌丝体最适于制备原生质体;综合考虑原生质体形成与再生的情况,作者选用1 mol/L山梨醇为最适渗透压稳定剂,1 g/dL蜗牛酶-1 g/dL纤维素酶-0.1 g/dL溶壁酶为最适裂解酶组合,30℃酶解2.5～3 h,最适合的原生质体的再生培养基为含0.6 mol/L MgSO4的TZ培养基。在PEG和CaCl2存在条件下,以潮霉素B为选择性标记,质粒pBC-Hygro转化原生质体,每微克DNA可获得4～5个转化子。

引用

页码：116 / 120

页数：5

共 10 条

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