单增李斯特菌单克隆抗体的制备及胶体金试纸的研制

被引:7
作者
崔焕忠 [1 ]
张辉 [1 ]
王兴龙 [2 ]
机构
[1] 吉林农业大学动物科技学院
[2] 军事医学科学院军事兽医研究所
关键词
单增李斯特菌; ActA; 原核表达; 免疫原性; 单克隆抗体; 胶体金试纸;
D O I
10.16656/j.issn.1673-4696.2010.01.021
中图分类号
S854.43 [];
学科分类号
0906 ;
摘要
原核表达了单增李斯特菌(LM)ActA蛋白,检测了表达蛋白的免疫原性,制备抗ActA单克隆抗体,并测定了单克隆抗体的亚型、效价及亲和力;研制出胶体金试纸,并对试纸的特异性、敏感性、重复性、稳定性及模拟样品进行了检测。结果成功表达了ActA蛋白;ActA诱导了特异性细胞免疫和体液免疫;获得了4株抗ActA单克隆抗体,其中3株为IgG1亚类,腹水抗体效价为1:32000~1:64000,均为高亲和力抗体;所研制的试纸不与绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌同属菌及大肠杆菌、沙门氏菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌异属菌发生交叉反应;对LM纯培养物及模拟样品检测的灵敏度均为3.9×105CFU/mL;4℃保质期在120d以上。表明,所研制的试纸具有快速、特异、敏感、稳定等优点,可用于LM的检测。
引用
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