恩诺沙星快速酶联免疫吸附法检测试剂盒的研制

被引:10
作者
陈雪岚 [1 ,2 ]
金晶 [2 ]
杨晓慧 [2 ]
机构
[1] 江西师范大学生命科学学院
[2] 北京中德大地食品安全技术开发有限责任公司
关键词
恩诺沙星; 酶联免疫吸附法; 单克隆抗体;
D O I
暂无
中图分类号
R446.6 [免疫学检验];
学科分类号
摘要
目的:研制恩诺沙星酶联免疫吸附法检测试剂盒。方法:采用EDC-NHS法制备ENR-M-BSA免疫原和ENR-OVA检测抗原,用ENR-M-BSA免疫BALB/C小鼠,采用甲基纤维素半固体培养基法筛选单克隆抗体并采用间接竞争ELISA对其进行分析。结果:通过公式计算ENR-M-BSA摩尔偶联比为15:1,ENR-OVA摩尔偶联比为7.2:1。筛选出1株特异性分泌株3E9,其腹水纯化后间接竞争ELISA测其效价为107,分型试剂盒测试显示此抗体属于IgG1型;检测限为1ng/mL,线性范围在1~100ng/mL之间,半量抑制浓度(IC50值)为10ng/mL,与4种结构类似物交叉反应均小于1%。结论:此株单克隆抗体可以用来建立恩诺沙星ELISA检测试剂盒。
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