槲皮素对人骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响及分子机制

目的 探讨槲皮素对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells, hBMSCs)增殖和成骨分化以及对特异AT序列结合蛋白2(SATB2)基因表达的影响。方法 噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度槲皮素对hBMSCs增殖活性的影响，碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)试剂盒检测ALP活性，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测成骨分化生物标志物Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(BGLAP)和分泌磷酸蛋白1(SPP1)mRNA的表达，qRT-PCR和蛋白免疫印迹(Western blot)检测SATB2 mRNA和蛋白表达变化，在hBMSCs转染SATB2特异性siRNA或SATB2过表达载体质粒，分析敲低或过表达SATB2对槲皮素干预的hBMSCs增殖和成骨分化的影响。结果 在一定范围内槲皮素呈浓度依赖性促进hBMSCs增殖，5μmol/L时促进细胞增殖效果最佳，选择5μmol/L的槲皮素用于后续研究。5μmol/L的槲皮素能够有效促进ALP活性以及Runx2、BGLAP和SPP1 mRNA的表达，并且能够上调SATB2 mRNA和蛋白表达。敲低SATB2能够阻碍槲皮素对hBMSCs增殖和成骨分化的促进作用，而过表达SATB2能够增强槲皮素对hBMSCs增殖和成骨分化的促进作用。结论 槲皮素可通过上调SATB2基因的表达促进hBMSCs增殖和成骨分化。